ELISA是酶聯(lián)接免疫吸附劑測定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的簡稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術(shù)之后發(fā)展起來的一種免疫酶技術(shù)。ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ)，將抗原、牽9體的特異性反應(yīng)與酶對底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗技術(shù)。用純化的抗體包被微孔板，制成固相載體，往包被抗C3抗體的微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化的抗C3抗體、HRP標(biāo)記的親和素，經(jīng)過洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的C3呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），計算樣品濃度。

1．定性測定

（1）ELISA試劑盒陽性判定值法（cut-offvalue，CO值）：一般為陰性對照的平均A值加一個常數(shù)，試劑制備嚴(yán)格標(biāo)準(zhǔn)化，要先計算出陽性對照A值平均數(shù)和陰性對照A值平均數(shù)。標(biāo)本A值≥CO值即為陽性。

（2）抑制率法：在競爭抑制法中結(jié)果可用抑制率表示。

抑制率（％）＝（A陰性對照A-A待測）／陰性對照X100％,一般以抑制率≥50％為陽性試劑盒。

2.半定量測定

結(jié)果一般以滴度表示。將標(biāo)本連續(xù)稀釋后，進(jìn)行ELISA檢測，在陽性臨界值以上的稀釋度即為該標(biāo)本的“滴度”。

3.定量測定

即用己知量的標(biāo)準(zhǔn)品作一系列稀釋后進(jìn)行ELISA試劑盒測定，與待測標(biāo)本同時進(jìn)行測定，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，結(jié)果以*量或活性單位表示之。