電化學(xué)發(fā)光免疫測定(Electrochemiluminescence immunoassay,ECLI)。ECLI 是繼放射免疫、酶免疫、熒光免疫、化學(xué)發(fā)光免疫測定以后的新一代標(biāo)記免疫測定技術(shù)。電化學(xué)發(fā)光法源于電化學(xué)法和化學(xué)發(fā)光法，而ECLI 是電化學(xué)發(fā)光(ECL)和免疫測定相結(jié)合的產(chǎn)物，是一種在電極表面由電化學(xué)引發(fā)的特異性化學(xué)發(fā)光反應(yīng)，包括了電化學(xué)和化學(xué)發(fā)光二個過程。ECL 不僅可以應(yīng)用于所有的免疫測定，而且還可用于DNA／RNA探針檢測。

電化學(xué)發(fā)光反應(yīng)原理

電化學(xué)反應(yīng)過程：在工作電極上(陽極)加一定的電壓能量作用下，二價的三氯聯(lián)吡啶釕 [Ru(bpy)3]2+ 釋放電子發(fā)生氧化反應(yīng)而成為三價的三氯聯(lián)吡啶釕 [Ru(bpy) 3 ] 3+ ，同時，電極表面的TPA也釋放電子發(fā)生氧化反應(yīng)而成為陽離子自由基 TPA+ ，并迅速自發(fā)脫去一個質(zhì)子而形成三丙胺自由基 TPA·，這樣，在反應(yīng)體系中就存在具有強氧化性的三價的三氯聯(lián)吡啶釕 [Ru(bpy) 3 ] 3+ 和具有強還原性的三丙胺自由基 TPA·。

1、化學(xué)發(fā)光過程：具有強氧化性的三價的三氯聯(lián)吡啶釕 [Ru(bpy) 3 ] 3+ 和具有強還原性的三丙胺自由基 TPA· 發(fā)生氧化還原反應(yīng)，結(jié)果使三價的三氯聯(lián)吡啶釕 [Ru(bpy)3]3+ 還原成激發(fā)態(tài)的二價的三氯聯(lián)吡啶釕 [Ru(bpy) 3 ] 2+ ，其能量來源于三價的三氯聯(lián)吡啶釕 [Ru(bpy) 3 ] 3+ 與三丙胺自由基 TPA· 之間的電勢差，激發(fā)態(tài) [Ru(bpy) 3 ] 2+ 以熒光機制衰變并以釋放出一個波長為 62Onm 光子的方式釋放能量，而成為基態(tài)的 [Ru(bpy) 3 ] 2+ 。

2、循環(huán)過程：上述化學(xué)發(fā)光過程后，反應(yīng)體系中仍存在二價的三氯聯(lián)吡啶釕 [Ru(bpy) 3 ] 2+ 和三丙胺(TPA)，使得電極表面的電化學(xué)反應(yīng)和化學(xué)發(fā)光過程可以繼續(xù)進(jìn)行，這樣，整個反應(yīng)過程可以循環(huán)進(jìn)行。

通過上述的循環(huán)過程，測定信號不斷的放大，從而使檢測靈敏度大大提高，所以 ECL 測定具有高靈敏的特點。

電化學(xué)發(fā)光免疫原理

上述的電化學(xué)發(fā)光過程產(chǎn)生的光信號的強度與二價的三氯聯(lián)吡啶釕 [Ru(bpy) 3 ] 2+ 的濃度成線性關(guān)系。

將二價的三氯聯(lián)吡啶釕 [Ru(bpy) 3 ] 2+  與免疫反應(yīng)體系中的一種物質(zhì)結(jié)合，經(jīng)免疫反應(yīng)、分離后，檢測免疫反應(yīng)體系中剩余二價的三氯聯(lián)吡啶釕 [Ru(bpy) 3 ] 2+ 經(jīng)上述過程后所發(fā)出的光，即可得知待檢物的濃度。