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標準曲線做的好與壞會直接影響到實驗的結果,甚至是關系到實驗的成敗。影響ELISA試劑盒曲線問題的原因做了結:
一、OD值不正常的可能原因是:
1、試劑盒未回溫,試劑盒回溫到25℃;
2、溫度控制不好,控制正確溫度;
3、孵育時間不準確,控制孵育時間;
4、洗滌時沖擊力太大、浸泡時間過長、洗滌次數(shù)增 加,洗滌4-5次,每孔250ul,然后拍干;
5、陽光直射,對著風直接吹,避風避;
6、酶標儀的波長錯誤,酶標儀的波長450nm;
7、抗體的稀釋錯誤,正確的稀釋抗體;
8、水質問題,用娃哈哈礦泉水代替。
二、白板的可能原因是:
1、洗滌液配制錯誤,正確的配制洗滌液;
2、少加液體(錯加液體),正確的步驟加液體。
三、無梯度可能原因是:
1、標準品也污染,換標準品點板;
2、OD值不正常,控制溫度時間在做一次;
3、人為點板,不要點板。
四 線性不好可能原因是:
OD值不正常,控制溫度時間在做一次。
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