采用HILIC色譜柱TSKgel Amide-80測(cè)定甜菜堿的含量

甜菜堿（Betaine）是一種生物堿，天然存在于很多動(dòng)植物體內(nèi)。其分子內(nèi)有3個(gè)有效甲基，作為甲基提供者參與合成蛋氨酸，在營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的代謝中起著十分重要的作用。甜菜堿在醫(yī)藥、化妝品、食品發(fā)酵和飼料工業(yè)等多個(gè)行業(yè)中都有廣泛的應(yīng)用。

 溶液配制

樣品稀釋液：75% 乙腈-水溶液。

用樣品稀釋液將甜菜堿儲(chǔ)備液 (2 mg/mL) 序列稀釋得到濃度為0 μg/mL，20 μg/mL，50 μg/mL，100 μg/mL，200 μg/mL，500 μg/mL，1000 μg/mL，2000 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)工作液，依次由低到高進(jìn)樣檢測(cè)。

 分析條件

色譜柱：TSKgel Amide-80 (3μm, 4.6mmI.D. ×15cm)

流動(dòng)相：乙腈-水，梯度洗脫

流速：1.0 mL/min

柱溫：30℃

紫外檢測(cè)器：205 nm

進(jìn)樣量：10 μL

流動(dòng)相梯度洗脫程序見下表：

 分析結(jié)果

圖2.  甜菜堿標(biāo)準(zhǔn)曲線（標(biāo)準(zhǔn)方差=0.99997）

本應(yīng)用參照行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)NY/T 2947-2016，按高效液相色譜法，采用親水作用多孔硅膠色譜柱TSKgel Amide-80 (3 μm, 4.6 mm I.D. × 15 cm) 來測(cè)定甜菜堿的含量。分析結(jié)果表明，該色譜柱完全滿足標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)甜菜堿分離檢測(cè)的要求。